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按照不同的方式進行分類與選擇合適的酶標板是行之有效的

更新時間:2022-09-13瀏覽:1280次

酶標板,是一種配合在酶標儀上,用來做酶聯免疫實驗的器材。雖然它看上去只是一塊普通的有孔的塑料板,但是在酶聯免疫實驗中,酶標板是一個不可少的中介,沒有了這個中介,整個實驗就無法進行操作。換一句話說,只要你用酶標儀做酶聯免疫實驗,就必然會用到酶標板。

酶標板種類繁多,可以按照不同的方式進行分類與選擇:

一:根據酶標板底部的不同,可以分為:

1、平底:平底的折射率低,適于在酶標儀檢測。
2、U型底:U型底的酶標板折射率較高,方便加樣、吸樣、混勻等操作,可以不用放在酶標儀上,直接通過目測觀察顏色變化情況,從而判定有無相應的免疫反應.
3、V型底:V底的酶標板可以精確的吸取樣品。

 

二:根據酶標板與蛋白和其它分子結合能力的不同,分為:

1、高結合力:表面經處理后,其蛋白結合能力大大增強,可達300~400ngIgG/cm2,主要結合的蛋白分子量>10kD。使用該類酶標板可提高敏感性,并可相對減少包被蛋白的濃度和用量,不足之處為較易產生非特異性反應??乖蚩贵w包被后,以非離子去污劑無法有效地封閉未結合蛋白的部位,需使用蛋白作為封閉劑。

2、中結合力:經表面疏水鍵被動與蛋白結合,適合作為分子量>20kD的大分子蛋白的固相載體,其蛋白結合能力為200~300ng IgG/cm2。由于該類酶標板所具有的僅與大分子結合的特性,適用于作為未純化抗體或抗原的固相載體,可降低潛在的非特異性交叉反應。該類板可以惰性蛋白或非離子去污劑作為封閉液。

3、氨基化:經表面改性處理后擁有帶正電荷的氨基,其疏水鍵由親水鍵取代。該類酶標板適合作為小分子蛋白的固相載體。使用合適的緩沖液和pH值,其表面可通過離子鍵與帶負電荷的小分子結合。由于其表面的親水特性和可通過其它交聯劑共價結合的能力,可用于固定溶于Triton-100、Tween 20等去污劑的蛋白分子。該類板的缺陷為由于降低了疏水性,一部分蛋白分子無法結合;此外,其表面需有效地封閉。由于親水和共價的表面特性,使用的封閉液必須能夠與非反應性氨基基團和所選擇的交聯劑中任何功能基團發生作用。

 

三:根據顏色分為:

1、透明:透明的是比較常用的,用于一般的酶聯免疫實驗。不能用透明的酶標板來進行化學發光實驗。
2、不透明:相對于透明的的板子,還有用于發光檢測用的不透明的板子,一般有黑色和白色兩種。黑色的酶標板自身會有光吸收,所以它的信號相對于白色的板子要低很多,因此一般用于檢測較強的光,如熒光檢測。而白色的酶標板就用于較弱的光檢測,常用于一般的化學發光。另外黑色的酶標板還可以消弱非特異反應帶來的問題。
 

 

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